【酵母双杂交技术的原理】酵母双杂交技术（Yeast Two-Hybrid System）是一种用于研究蛋白质相互作用的分子生物学方法，广泛应用于功能基因组学、信号转导和蛋白质组学等领域。该技术的核心在于利用酵母细胞内报告基因的表达来检测两个蛋白质是否发生相互作用。
该系统基于真核生物转录因子的结构特点，通常使用GAL4转录因子作为基础。GAL4蛋白由两个结构域组成：DNA结合域（BD）和转录激活域（AD）。在正常情况下，GAL4通过BD与启动子中的特定序列结合，然后通过AD激活下游报告基因的表达。
当两个目标蛋白分别与BD和AD融合后，若这两个蛋白能够发生相互作用，则BD和AD会靠近，从而形成有活性的转录因子，激活报告基因的表达。这种表达可以通过选择性培养基或显色反应进行检测。
酵母双杂交技术原理总结表
| 项目 | 内容说明 |
| 技术名称 | 酵母双杂交技术（Yeast Two-Hybrid System） |
| 基本原理 | 利用蛋白质之间的相互作用导致转录因子复合体的形成，进而激活报告基因的表达 |
| 关键蛋白 | GAL4转录因子（含DNA结合域BD和转录激活域AD） |
| 实验设计 | 将待测蛋白A与BD融合，蛋白B与AD融合 |
| 相互作用判断 | 若蛋白A与蛋白B互作，BD与AD接近，激活报告基因 |
| 报告基因 | 常见如HIS3、ADE2、LacZ等，用于筛选阳性克隆 |
| 应用领域 | 蛋白质相互作用研究、功能基因组分析、信号通路解析等 |
| 优点 | 操作简便、灵敏度高、适用于多种真核蛋白 |
| 局限性 | 仅适用于可溶性蛋白、可能产生假阳性或假阴性结果 |
通过上述总结和表格，可以清晰了解酵母双杂交技术的基本原理及其在蛋白质相互作用研究中的重要作用。该技术为探索生命活动中的分子机制提供了有力工具。
